AF626 Marked Oils, Warehouse Test
The Comparator 2000+ is an easy-to-use, entry level colour measurement system that compares the colour of the sample directly against the colour of glass in a disc. All you need to do is rotate the disc to get the closest result to the scale.
Part Number 416260
Applications
- Petroleum Oils and Waxes
Product information
open/close all Description
- Self-Contained Kit to Determine Quinizarin Market
The AF 626 contains everything you need to determine the correct amount of Quinizarin Marker is present in diesel fuel. - Fast, Economical & Portable Visual Matching
The Comparator 2000+ is a flexible, modular system for Visual Colour Grading. Using a suitable comparator instrument and glass disc, you can quickly visually match the sample directly against the calibrated, colour stable glass standards. - Two-Field Vision for Accurate Results
Lovibond® comparator instruments include an integrated prism which causes the sample and comparison fields to overlap, allowing enhanced colour discrimination and matching. The prism is ultrasonically sealed to prevent contamination of the optics. Each individually graded glass standard represents a discrete step on the measurement range (as opposed to a continuous graduation), aiding colour discrimination and allowing great accuracy of results. - Ability to Guarantee Constant Lighting Conditions
An optional item for the Comparator 2000+ is the Daylight 2000 Lighting Unit. This is a standardised light source which guarantees you a constant lighting condition for accurate colour grading. This is particularly useful when the sample is very pale in colour. By using a Lovibond ® lighting unit, you can confident of uniform lighting conditions for colour matching, 24 hours a day and irrespective of ambient lighting. - Extended Shelf Life
The unique feature of Lovibond ® test discs is that they incorporate coloured glass standards that are colour stable and not affected by UV light or extreme environmental conditions.
Please note, we cannot guarantee compatability of discontinued Lovibond ® Comparator 1000 disks with the Lovibond ® 2000+ Comparator.
Technical Data
| Colour Type | Transparent |
| Portability | Portable |
Delivery Content
- Sturdy Case Including
- 1 x Lovibond 2000+ Comparator
- 1 x 4/43B Marked Oils Disc
- 4 x Extr’Tubes Cal.2.5,5,10,17.5CC
- 1 x Tube Universal
- 2 x Syringe Glass 2ml
- 6 x Syringe 2 ml Plastic
- 1 x Brush Test Tube 406/L 195mm
- 1 x Butan-1-OL Solution (100 ml)
- 1 x Sodium Hydroxide 10% (100 ml)
- Products
- Lab & Portable Instruments
- PTV Process Turbidimeters
- Reagents
- Standards & Solutions
- Test Kits
- Incubators & Reactors
- Microbiology
- Software
- Accessories
- Parameter
- Methods
- Drinking Water Treatment
- Waste Water Treatment
- Raw Water Treatment
- Boiler Water
- Cooling Water
- Disinfection Control
- Pool Water Control
- Pool Water Treatment
- Disaster Management
- Food and Beverage
- Power and Energy
- Municipalities
- Oil and Gas
- Pharmaceutical Industry
- Food and Beverage Industry
- Chemical Industry
- Marine Industry
- Industries others
- Pool Public
- Pool Domestic
- Pool Services
- NGO
- Download Center
- Certificates of Analysis
- Service Products
- Video Tutorials
- Knowledge Base
- Handbook of Methods
- Catalogue Enquiry
- Pool Handbook
- Products
- Visual Measurement
- Automatic Transmission Measurement
- Automatic Reflectance Measurement
- TA 4 Online-Colorimeter
- Cuvettes / cells
- Standards
- Accessories
- Certification, Calibration & Service
- Colour Lab
- Edible Oils and Fats
- Beers, Malts and Caramels
- Sugar Solutions, Syrups and Honey
- Food and Beverage
- Petroleum Oils and Waxes
- Plastics
- Coatings
- Textiles
- Household Products
- Medical and Clinical Products
- Pharmaceuticals and Cosmetics
- Chemicals
- Others
- Video Tutorials
- Download Centre
- Instrument registration
- Knowledge Base
- Service Centre
- About Tintometer
- Company Structure
- Imagefilm
- Awards
- Field Sales Representative Eastern Europe (m/f/d)
- Field Service Engineer — India — Location Hyderabad (India)
Кондиционер, дыры в трубке. Ультрафиолетовый течеискатель (UV-краситель, маркер), масло PAG 46. Промывка испарителя. Suzuki Liana
Комплект имеет штуцер, очень удобно! Штуцер имеет клапан («только туда»).
Можно в дальнейшем использовать для заливки масла!
Жидкость похожа на масло, но не масло, испаряется, остается краска…
С водой не смешивается, но в горячем мыльном растворе постепенно растворяется-смывается.Устанавливаем, давим… не давится?
Запускаем двигатель, включаем кондиционер (компрессор) … давится намного легче.
Если фриона почти нет, то само засасывать будет…
Т.к. давление в холодной трубе падает при работе .
Не торопясь вкачиваем маркер, закрываем нипель, наклеиваем наклейку…Цена упаковки 6 доз (6 машин) 420, если скинуться, то получится до 100 р.
Этим же щприцем добавил масло ~40…50 мл PAG 46.
===========================
Под подозрение попадает трубка на радиатор ! ! !
(95732-54G10 / 95732-54G11 / ZV9573G11 )
Год назад она (трубка) выглядела так, в масле и пыли
(а я думал. что она смазана предыдущим владельцем)
Очистил трубку, запустил компрессор (кондиционер)…
Заметил нарастающую каплю масла!
Фрион не выходил, т.к. трубка и нижняя часть радиатора заполнена маслом.
Дырка обнаружена!
На это место одел разрезанный дюритовый шланг и хомут (и еще два по бокам).
Масло, за предыдущее время, уходило заметно, да и радиатор в этом месте подзабился пылемаслом за год…
Дозаправил фреоном до осветления глазка и еще немного.
На момент заправки температура ОЖ была ~90 гр, включались оба вентилятора.
При установке максимального охлаждения и максимальной скорости вентилятора салона, работает непрерывно (на улице жарко).
Давление при заправке было в районе ~ 200 / 1500, входная трубка испарителя теплая, не горячая (при работе двух вентиляторов).=============== 2018 08 16 ===========
Провел внешнюю промывку испарителя.
Runway Air Conditioner Cleaner (артикул RW6122)
Нагрел баллон, встряхнул, засунул трубку в дренажное отверстие (до середины),
(уплотнитель из изоленты не позволяет вытекать], выпустил пену,
слил слегка загрязненную жидкость (чуть маслянистая, долго сохнущая ~50 гр)…
Однако, нет уверенности, что весь испаритель был покрыт пеной…============== 2019 04 25============= 134200 км ===
По весне проверил, пена в окне. заряжал 2017 05, прошло 2 года, но кендей использовался редко.
Пыле-масляные наросты в районе сочленения трубок. Очистил… смотрим…
Будем заправлять… Вес баллона до заправки (со штуцером) 853 гр, после 665 гр D=188 гр.
Допустим часть упущено, залил ~150 гр, дплее 10 гр масла, и порция течеискателя 7 гр
(Пена пропала сразу, в начале заправки.)Далее компрессор работал непрерывно (со своим вентилятором),
трубка на входе испарителя горячая более +70 гр.
(при установленной мин температуре и максимальных оборотах вентилятора печки)…Далее по достижении 90 гр ОЖ, компрессор и оба вентиляторы стали работать втроем, включаясь и выключаясь по несколько секунд, трубка стала теплая…
Если температура ОЖ менее 90 гр и вентилятор ОЖ не включается, то рекомендуется ставить вентилятор отопителя на середину, а регулятор температуры на верхнюю границу голубой линии, кондиционер будет работать с перерывами, не будет перегрева тонкой трубки (высокого давления)
В движении все определяется напором воздуха…
.
.
===== 2019 05 16 =====
Снял бампер. После 2-3 недельного отмачивания крепеда в WD
Радиатор надо готовить на замену…
Обнаружена вторая дырка в трубке кондиционера.
Заделал старым методом, разрезанный шланг и три хомута.
Радиатор и так весь избитый-забитый, поэтому, видимо сниму сетку радиатора,
чтобы улучшить охлаждение «на Геленджик»…
.
.
==== 2019.05.21 ============= утепление обратки
Минусы:
— возможность гидроудара;
— коррозия от запотевания.
Но, решил на лето попробовать, пока жарко.Измерение температуры хх, режим ноги-рожа, вентилятор 3-я скорость, синий сектор :
Температура толстой трубки на выходе из испарителя 6…12 гр,
температура охлажденного воздуха воздуха 8,6…8,9 гр.Измерение температуры трасса, режим ноги-рожа, вентилятор 3-я скорость, синий сектор :
Температура толстой трубки на выходе из испарителя 8+-2 гр,
температура охлажденного воздуха воздуха 8 +-0,5 гр.Оминантные молекулярные маркеры мутации высокоолеиновости масла в семенах подсолнечника Текст научной статьи по специальности «Биологические науки»
На сегодняшний день перспективными являются сорта и гибриды подсолнечника с высоким содержанием олеиновой кислоты. В связи с этим необходима разработка и валидация методов молекулярно-генетического выявления мутации высокоолеиновости масла в материале подсолнечника российской селекции, что способствовало бы ускорению селекционного процесса при помощи маркер-ассоциированного отбора. Материалом для исследования служили константные линии и гибриды F1 генетической коллекции ВНИИМК, отличающиеся по признаку содержания олеиновой кислоты в семенах. Геномную ДНК выделяли из семядольных листьев 5-7-днев-ных проростков подсолнечника с использованием СТАВ-буфера. Амплификацию выполняли в термоциклере S1000тм (BioRad, США). Использовали 11 INDEL, HO-specific fragment и SSR-праймеров, разработанных иностранными авторами. Экспериментальным путем были подобраны оптимальные температуры гибридизации (отжига) всех праймерных комбинаций с матрицей ДНК. Они составили от 50 до 65 °С. Размеры амплифицированных фрагментов ДНК в основном соответствовали полученным авторами, разработавшими данные маркеры. Генотипирование высокоолеиновых и линолевых образцов подсолнечника проводили с использованием семи пар праймеров. Из анализированных локусов два (F13/R5 и N1-1F/N1-1R) амплифицируются у всех генотипов независимо от наличия мутации Ol . Это позволяет использовать их для исключения ложноотрицательных результатов на наличие мутации . Локусы N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R F4/R1 являются доминантными и маркируют наличие мутации Ol у высокоолеиновых генотипов. Данные маркеры просты в использовании и требуют применения только агарозных гелей. Представленные результаты могут быть использованы для маркер-сопутствующего отбора родительских мутантных форм при получении гибридов на основе генотипов, различающихся по жирно-кислотному составу.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.
Похожие темы научных работ по биологическим наукам , автор научной работы — Гучетль С.З.
Создание и изучение рекомбинантных инбредных линий подсолнечника с различным содержанием олеиновой кислоты в масле семян
Устойчивость мутации высокоолеиновости масла к действию супрессора в семенах подсолнечника
Материнский эффект в наследовании признака среднеолеиновости масла в семенах подсолнечника у гибридов первого поколения
Поиск супрессорных генотипов по мутации высокоолеиновости масла семян подсолнечника
Наследование признака среднеолеиновости масла в семенах подсолнечника у гибридов второго и третьего поколений
i Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
i Надоели баннеры? Вы всегда можете отключить рекламу.DOMINANT MOLECULAR MARKERS OF MUTATION OF HIGH OLEIC OIL IN SUNFLOWER SEEDS
Currently, sunflower varieties and hybrids with high content of oleic acid are very promising. Thus, it is necessary to develop and validate metods of molecular-genetic searching of mutation in high oleic oil of sunflower of the Russian breeding that can advance breeding process using marker-associated selection. As a material we used constant lines and F1 hybrids from the genetic collection of the V.S. Pustovoit All-Russian Research Institute of Oil Crops (VNIIMK) which are differed by a content of oleic acid on seeds. We evolved genomic DNA from cotyledons of 5-7-days sunflower seedlings using SТАB-buffer. Amplification was done in thermal cycler S1000тм (BioRad, США). We used 11 INDEL, HO-specific fragment и SSR-primers developed by foreign authors. In an experimental way, we selected optimal temperatures for hybridization (annealing) for all the primers combinations with DNA matrix. They were from 50 to 65 °С. Sizes of amplified DNA fragments generally corresponded to the same ones the authors of these markers had. Genotyping of high oleic and linoleic sunflower samples was done using seven pairs of primers. Two loci (F13/R5 и N1-1F/N1-1R) of the studied ones amplified in all genotypes independently of a presence of Ol mutation . This allows their using to exclude false negative results for mutation presence. Loci N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R F4/R1 are dominant and indicate Ol mutation in high oleic genotypes. These markers are easy to use and require only agar gel usage. The results presented in this article can be used for marker-assistant selection of parental mutant forms in development of hybrids basing on the genotypes differed with their fatty-acid composition.
Текст научной работы на тему «Оминантные молекулярные маркеры мутации высокоолеиновости масла в семенах подсолнечника»
ISSN pr. 2412-608X, ISSN on. 2412-6098 Масличные культуры. Вып. 2 (182), 2020
Доминантные молекулярные маркеры мутации высокоолеиновости масла в семенах подсолнечника
кандидат биологических наук
ФГБНУ ФНЦ вниимк
Россия, 350038, г. Краснодар, ул. им. Филатова, д. 17 E-mail: saida.guchetl@mail.ru
Для цитирования: Гучетль С.З. Доминантные молекулярные маркеры мутации высокоолеиновости масла в семенах подсолнечника // Масличные культуры. — 2020. — Вып. 2 (182). — С. 24-32.
Ключевые слова: молекулярные маркеры, по-лимеразная цепная реакция, подсолнечник, высо-коолеиновость, мутация.
На сегодняшний день перспективными являются сорта и гибриды подсолнечника с высоким содержанием олеиновой кислоты. В связи с этим необходима разработка и валидация методов молекулярно-генетического выявления мутации высокоолеиновости масла в материале подсолнечника российской селекции, что способствовало бы ускорению селекционного процесса при помощи маркер-ассоциированного отбора. Материалом для исследования служили константные линии и гибриды Fi генетической коллекции ВНИИМК, отличающиеся по признаку содержания олеиновой кислоты в семенах. Геномную ДНК выделяли из семядольных листьев 5-7-дневных проростков подсолнечника с использованием СТАВ-буфера. Амплификацию выполняли в тер-моциклере S1000™ (BioRad, США). Использовали 11 INDEL, HO-specific fragment и SSR-праймеров, разработанных иностранными авторами. Экспериментальным путем были подобраны оптимальные температуры гибридизации (отжига) всех праймерных комбинаций с матрицей ДНК. Они составили от 50 до 65 °С. Размеры амплифициро-ванных фрагментов ДНК в основном соответствовали полученным авторами, разработавшими данные маркеры. Генотипирование высокоолеиновых и линолевых образцов подсолнечника проводили с использованием семи пар праймеров. Из анализированных локусов — два (F13/R5 и N1-
1F/N1-1R) амплифицируются у всех генотипов независимо от наличия мутации 01. Это позволяет использовать их для исключения ложноотрица-тельных результатов на наличие мутации. Локусы N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R F4/R1 являются доминантными и маркируют наличие мутации 01 у высокоолеиновых генотипов. Данные маркеры просты в использовании и требуют применения только агарозных гелей. Представленные результаты могут быть использованы для маркер-сопутствующего отбора родительских мутантных форм при получении гибридов на основе генотипов, различающихся по жирно-кислотному составу.
Dominant molecular markers of mutation of high oleic oil in sunflower seeds S.Z. Guchetl, PhD in biology
V.S. Pustovoit All-Russian Research Institute of Oil Crops (VNIIMK)
17, Filatova str., Krasnodar, 350038, Russia E-mail: saida.guchetl@mail.ru
Key words: molecular markers, polymerase chain reaction, sunflower, high oleic, mutation.
Currently, sunflower varieties and hybrids with high content of oleic acid are very promising. Thus, it is necessary to develop and validate metods of molecular-genetic searching of mutation in high oleic oil of sunflower of the Russian breeding that can advance breeding process using marker-associated selection. As a material we used constant lines and Fi hybrids from the genetic collection of the V.S. Pustovoit All-Russian Research Institute of Oil Crops (VNIIMK) which are differed by a content of oleic acid on seeds. We evolved genomic DNA from cotyledons of 5-7-days sunflower seedlings using STAB-buffer. Amplification was done in thermal cycler S1000™ (BioRad, США). We used 11 INDEL, HO-specific fragment и SSR-primers developed by foreign authors. In an experimental way, we selected optimal temperatures for hybridization (annealing) for all the primers combinations with DNA matrix. They were from 50 to 65 °C. Sizes of amplified DNA fragments generally corresponded to the same ones the authors of these markers had. Genotyping of high oleic and linoleic sunflower samples was done using seven pairs of primers. Two loci (F13/R5 и N1-1F/N1-1R) of the studied ones amplified in all genotypes independently of a presence of Ol mutation. This allows their using to exclude false negative results for mutation presence. Loci N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R F4/R1 are dominant and indicate Ol mutation in high oleic genotypes. These markers are easy to use and require only agar gel usage. The results presented in this article can be used for marker-
assistant selection of parental mutant forms in development of hybrids basing on the genotypes differed with their fatty-acid composition.
Введение. Подсолнечник является одной из важнейших масличных культур как у нас в стране, так и во всем мире. Получаемое из него растительное масло составляет основу рационального питания населения. Подсолнечное масло является наиболее употребляемым в нашей стране. Обладая большой энергетической ценностью, оно представляет собой главный источник биологически активных компонентов в рационе питания: моно- и полиненасыщенных жирных кислот, лецитинов (фосфолипидов), фитостеринов, витаминов. Стандартное подсолнечное масло богато полиненасыщенной линоле-вой кислотой, которая составляет около 60 % от суммы жирных кислот подсолнечного масла. Вторая наиболее распространенная — это мононенасыщенная олеиновая кислота с содержанием на уровне 30 % [1]. Потребительский спрос требует не только стандартные масла, но и растительные масла с измененными свойствами. Наиболее перспективными на сегодняшний день являются сорта и гибриды подсолнечника с высоким содержанием олеиновой кислоты. Мутация высокоолеиновости масла в семенах подсолнечника (01) получена впервые в мире во ВНППМК и в 1976 г. создан высокоолеиновый сорт подсолнечника Первенец [2]. Этот сорт стал уникальным донором данного признака в селекционных программах во всем мире Олеиновая кислота является одной из основных жирных кислот, входящих в состав масла семян подсолнечника. Её содержание в различных сортах и гибридах подсолнечника может колебаться в широких пределах — от 10-30 % (сорта с традиционным жирно-кислотным составом) до 80-92 % (высокоолеиновые сорта) [2; 3]. Повышенное содержание олеиновой кислоты в подсолнечном масле значительно улучшает его потребительские качества. В связи с высокой окислительной стабильностью вы-
сокоолеиновое подсолнечное масло более устойчиво в процессе жарки, к воздействию высоких температур. Отсутствие транс-жирных кислот делает его более полезным для здоровья. Кроме того, такое масло имеет больший срок годности по сравнению со стандартным. В переработке высокоолеиновое масло снижает затраты на очистку, его легче транспортировать и хранить [3]. Мутант-ный фенотип экспрессируется только в семенах и обусловлен отсутствием активности фермента дельта-12-десатуразы. В норме данный фермент катализируют введение двойной связи в олеиновую кислоту (С 18:1) с превращением её в ли-нолевую (С 18:2) [4].
С молекулярно-генетической точки зрения, увеличение содержания олеиновой кислоты обусловлено частичным дублированием аллеля FAD2-1, который вызвал подавление экспрессии гена FAD2-1 [4; 5], который кодирует фермент дельта-12-десатуразу. Таким образом, как стандартный, так и высокоолеиновый генотипы содержат последовательность FAD2-1. Однако у высокоолеиновых генотипов имеется дополнительная межгенная область (IGR), разделяющая общую последовательность FAD2-1, и укороченные интрон и экзон, которые представляют собой дублированную последовательность, обозначенную как FAD2-1D [5]. Это FAD2-1 дублирование называется 01 мутацией. G.F. Schuppert et al. разработали доминантные маркеры INDEL для обнаружения мутации 01 (наличие или отсутствие тандемных повторов FAD2-1) и идентифицировали почти 50 SNP и несколько INDEL для FAD2-1 [5]. S. Lacombe et al. и A. Berville et al. разработали два типа маркеров. Первый -кодоминантные маркеры SSR, расположенные в интроне предполагаемого гена FAD2-1 и тесно сцепленные с мутацией. Второй — доминантные маркеры, специфичные для мутации [6; 7]. В последние несколько лет исследования по идентификации подходящих и простых в ис-
пользовании молекулярных маркеров для обнаружения высокоолеиновых генотипов увеличились из-за растущего интереса селекционных компаний к большему разнообразию генотипов подсолнечника с таким жирно-кислотным составом масла. Несколько авторов работали над разработкой методов обнаружения генов 01 с использованием известных молекулярных маркеров [8; 9; 10], но полученные результаты показали необходимость дальнейшей валидации данных методов в разных популяциях подсолнечника и на разном генетическом фоне [9; 10].
Во ВНИИМК на протяжении многих лет проводятся исследования по изучению состава жирных кислот в масле семян подсолнечника и наследования данного признака [11; 12; 13; 14]. Была разработана биологическая классификация генетической коллекции ВНИИМК по содержанию олеиновой кислоты на основе разделения на классы фенотипов образцов с определенным жирно-кислотным профилем [15]. Но не были разработаны методы молекулярно-генетического выявления мутации высо-коолеиновости масла в материале подсолнечника российской селекции, которые способствовали бы ускорению селекционного процесса при помощи маркер ассоциированного отбора. В связи с этим цель исследования: идентифицировать и валидировать простые в использовании молекулярные маркеры, которые будут наиболее эффективными для обнаружения мутации высокоолеиновости масла у подсолнечника.
Материалы и методы. Материалом для исследования служили константные линии генетической коллекции ВНИИМК и гибриды Fi, отличающиеся по признаку содержания олеиновой кислоты в семенах, предоставленные сотрудниками лаборатории генетики ВНИИМК. Линии, которые несли мутацию высокоолеиновости масла: ВК 876, ВК 541, НА 422, ВК 680, ЛГ 26, ВК 508, ВК 195, ВК 805, RHA
345. Линии без данной мутации: ЛГ 28, 83HR4, ВК 580.
Кроме вышеприведенных линий, были проанализированы четыре гибридные комбинации первого поколения: ВК 541 х ВК 580; НА 422 х ВК 580; ЛГ 26 х ВК 580; ВК 508 х ВК 580.
Геномную ДНК выделяли из семядольных листьев 5-7-дневных этиолированных проростков подсолнечника с помощью модифицированного метода Saghai-Maroof et al. [16] с использованием СТАВ-буфера. Для определения однородности генотипов отбирали по пять индивидуальных растений каждого образца. Растительную ткань измельчали с использованием гомогенизатора Speed Mill plus (Analytic Jena, Германия). Для проведения ПЦР использовали 25 мкл реакционной смеси следующего состава: 67 мМ трис-HCl, pH 8,8; 16,6 мМ сульфата аммония; 1,5-3 мМ MgCh; 0,01 % Tween 20; по 0,2 мМ дезоксирибонуклеозидфосфа-тов; по 10 пМ праймеров; 10 нг матричной ДНК и 1 ед. рекомбинантной термостабильной ДНК полимеразы (Сиб-энзим, Москва). Амплификацию выполняли в термоциклере S1000™ (BioRad, США). Условия амплификации: начальная денатурация при 96 °С в течение 2 мин; затем 30 циклов при соблюдении темпе-ратурно-временного режима: отжиг при 50-65 °С (в зависимости от праймера) в течение 40 с, элонгация — 1 мин при 70 °С, денатурация при 94 °С — 30 с, финальная элонгация — 2 мин. Использовали 11 IN-DEL, HO-specific fragment и SSR-праймеров, разработанных зарубежными авторами [5; 6; 7] (табл. 1). Для амплификации длинных фрагментов ДНК (больше 1000 пар нуклеотидов (п. н.) использовали программу LD ПЦР, описанную Schuppert et al. [5]. Праймеры были изготовлены ООО «Синтол» (Москва, Россия).
Нуклеотидные последовательности прай-меров, использованных в работе
г. Краснодар, ВНИИ1У [К, 2020 г.
Название прай-мера Последовательность нуклеотидов праймера Источник
F 13 ТСА АСА GCC ТСТ ТСС ТСС ТСА G Schuppert et al., 2006
R5 GTA GTT TTG GAA AGC TAG AGA CC -//-
F4 GTA ACG TCT GCG CGC TTG CAG АСА ТСА
R1 GGT TTT GCA TGA GGG ACT CGA TCG AGT G -//-
N1-2F CAA ACC ACC ACC CAC TAA С Bervillé et al., 2009; Lacombe et al., 2009
N1-3F GAG AAG AGG GAG GTG TGA AG -II-
N2-1R AGC GGT TAT GGT GAG GTC AG -II —
N2-2R АСА AAG CCC АСА GTG TCG TC -II-
N2-3R GCC ATA GCA АСА CGA TAA AG -II —
N1-1F TTG GAG TTC GGT TTA TTT AT -II-
N1-1R TTA GTA AAC GAG CCT GAA С -II-
Электрофорез продуктов амплификации проводили в агарозном геле (2 % ага-роза, 1 х SB-буферы) с использованием камеры для горизонтального электрофореза (SE.2, ДНК-технология, Россия) в течение 1-1,5 ч при силе тока 58 m А и напряжении 90-100 V. Последующее окрашивание осуществляли бромистым этидием. Визуализация результатов электрофореза в ультрафиолетовом свете и их документирование обеспечивались при помощи системы цифровой документации видеоизображения BIO-PRINT (Vilber Lourmat, Франция). Размер фрагментов ДНК определяли с использованием программного обеспечения Bio-Capture (Vilber Lourmat, Франция) относительно маркера длины фрагментов ДНК GeneRuler 100 bp DNA Ladder Thermo Scientific (Сибэнзим, Россия).
Результаты и обсуждение. Для вали-дации известных молекулярных маркеров в первую очередь было необходимо определить для них оптимальные условия и температурные режимы ПЦР. Экспериментальным путем были подобраны оптимальные температуры гибридизации (отжига) всех праймерных комбинаций с матрицей ДНК и определены молекулярные массы продукта ПЦР (табл. 2). Оптимальные температуры отжига для разных
пар праймеров составили от 50 до 65 °С, молекулярные массы фрагментов ДНК -от 210 до 3000 п. н.
Оптимальные температурные режимы для ПЦР анализа ДНК-локусов и молекулярные массы амплифицированных фрагментов ДНК
г. Краснодар, ВНИ ИМК, 2020 г.
Пара праймеров Молекулярная масса продукта (п. н.) Оптимальная tora _( С)
F13/R5 280 342 60
F4/R1 590 653 60
N1-2F7N2-1R 3000 3100 64-58
N1-3F/N2-1R 870 891 65
N1-3F/N2-2R 925 1000 60
N1-3F/N2-3R 1200 1400 60
N1-1F/N1-1R 210 240 50
Все праймерные пары гибридизова-лись с ДНК. Размеры амплифицированных фрагментов ДНК в основном соответствовали полученным авторами, разработавшими данные маркеры [5; 6; 7]. Генотипирование высокоолеиновых и низкоолеиновых образцов подсолнечника и их гибридов проводили с использованием семи пар праймеров: одного SSR (N1-1F/N1-1R), четырех НО PCR-specific fragment (N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R) и двух INDEL (F4/R1, F13/R5).
Согласно литературным данным, ПЦР-амплификация SSR-локуса N1-1F/N1-1R приводит к фрагментам 243/246/249 п. н., соответствующим 15/16/17 ТТА-повторам соответственно. Высокоолеиновые генотипы подсолнечника имеют 16 повторов ТТА, тогда как низкоолеиновые — 17 повторов ТТА [7]. Полученные нами результаты ПЦР после разделения продуктов в агарозном геле выявили одну фракцию ДНК длиной 240 п. н., которая присутствовала у всех генотипов — и высокоолеиновых, и линолевых (табл. 3).
Маркер F13/R5 был разработан как ко-доминантный INDEL для FAD2-1 и выявлял до 8 аллелей у кондитерского и масличного подсолнечника с разным со-
держанием олеиновой кислоты [5]. В нашем исследовании он показал себя как мономорфный, амплифицировал фракцию приблизительно 340 п. н. в линиях и потомствах со всеми типами содержания олеинового масла в семенах подсолнечника (табл. 3, рис. 1). В связи с этим пары праймеров и ИЗЖ5
рассматриваются нами как фланкирующие контрольные бенды 240 и 340 п. н. соответственно, которые амплифициру-ются несмотря на наличие или отсутствие мутации 01.
Характеристика линий и гибридов Т7? генетической коллекции ВНИИМК по наличию фрагментов ДНК, маркирующих ген 01
г. Краснодар, ВНИИМК, 2020 г.
N1-3FZ N2-1R N1-3F/ Шш N1-3F/ N2-3 R N1-2F/ N2-1R F4-R1 N1-11″ NMR SSR F13/ R5
ЛГ 26 ВК 580 «Й i + + Á + i ‘Í’
* Знаком (+) обозначается наличие у образца маркерного фрагмента ДНК; (-) — отсу тствие такового
Пять маркеров, использованные в этом исследовании, позволили выявить различия между высокоолеиновыми и линоле-выми линиями. Маркеры Р4/Я1 [5], N1-2Ш2-1К, Ш-ЗРШ-т, №-ЗТ/№-2Я, N1-ЗРЛМ2-ЗЯ [6; 7] обнаружили отличия между линиями. Однако ни один из них не показал дискриминации между гомозиготным и гетерозиготным генотипом (табл. 3). 28
М ок 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 И 12 13 14 15 16
Рисунок 1 — Электрофоретические спектры ДНК подсолнечника, амплифи-цированной с праймерной парой F13/R5: Дорожки: 1 — ВК 876; 2 — ВК 541; 3 — НА 422; 4 — ВК 680; 5 — ВК 805; 6 — 26; 7 — ВК 508; 8 — ВК 195; 9 — ЛГ 27; 10 — ЛГ 28; 11 — 83HR4;
12 — ВК 580; 13 — Fi (ВК 541 х ВК 580); 14 — Fi (НА 422 х ВК 580); 15 — Fi (ЛГ 26 х ВК 580); 16 — Fi (ВК 508 ж ВК 580);
М — маркер молекулярной массы 100 Ьр, ок — отрицательный контроль
Молекулярный маркер N1-3F/N2-1R был создан для амплификации высокоолеинового специфического фрагмента и выявляет фракцию приблизительно 891 п. н. [6; 7]. В нашем исследовании пара праймеров амплифицировала полосу приблизительно 870 п. н. у высокоолеиновых линий и в потомствах Fi, тогда как этот фрагмент отсутствовал у стандартных линолевых линий (табл. 3, рис. 2).
Рисунок 2 — Электрофоретические спектры ДНК подсолнечника, амплифи-цированной с аллель-специфичными праймерами по гену Ol N ¡-3I7N2-1R: Дорожки: 1 — ВК 876; 2 — ВК 541; 3 — НА 422; 4 — Fi (ВК 541 х ВК 580); 5 — Fi (НА 422 * ВК 580); 6 — Fi (ЛГ 26 X ВК 580); 7 — Fi (ВК 508 х
ВК 580); 8 — ЛГ 27; 9 — ЛГ 28; 10 — 83HR4; 11 — ВК 580. Стрелками обозначены фрагменты ДНК 870 п. н., маркирующие мутацию высокоолеиновости масла, и 650 п. н., присутствующие у всех генотипов
Кроме того, этот праймер амплифицировал фракцию 650 п. п.. общую между образцами, несущими и не несущими
мутацию 01 (рис. 2). Степень выраженности фракции была разной у линий с разными генотипами, что не позволило использовать данную фракцию как контрольную.
Молекулярный маркер X1-317X2-2 И. также был разработан для амплификации высокоолеинового специфического фрагмента и, согласно литературным данным, амплифицирует фракцию приблизительно 1000 п. н. [6; 7]. В нашем исследовании пара праймеров амплифицировала фрагмент ДНК приблизительно 925 п. н. у высокоолеиновых линий и в потомствах ]•’|, тогда как этот фрагмент отсутствовал у линолевых линий (табл. 3, рис. 3). Как и у предыдущей пары праймеров, была ам-плифицирована фракция, общая между образцами, несущими и не несущими мутацию 01 (рис. 3). Размер данного фрагмента ДНК составил 500 п. н. Степень выраженности фракции была разной у линий с отличающимися по содержанию олеинового масла генотипами, что также не позволило использовать её как контрольную.
i Не можете найти то, что вам нужно? Попробуйте сервис подбора литературы.
Рисунок 3 — Э л е ктроф орет и чес к ие спектры ДНК подсолнечника, амплифи-цированной с аллель-специфичными праймерами по гену Ol X1-3F/X2-2R: Дорожки: 1 — ВК 876; 2 — ВК 541; 3 — НА 422; 4 — Fi (ВК 541 х ВК 580); 5 — I’ (НА 422 * ВК 580); 6 — Fi (J1F 26 * ВК 580); 7 — Fi (ВК 508 х ВК 580); 8 — ЛГ 27; 9 — ЛГ 28; 10 — ВК 580. М — маркер молекулярной массы 100 Ьр. Стрелками обозначены фрагменты ДНК 925 п. н., маркирующие мутацию высокоолеиновости масла, и 500 п. н., присутствующие у всех Генотипов
Молекулярный маркер X1-3F/X2-3R является аллель-специфичным маркером
к мутантному аллелю гена РАВ2-1В. Показано, что пара праймеров, фланкирующих данный локус, амплифицирует фракцию ДНК приблизительно 1400 п. н. [6; 7]. В результате наших исследований высокоолеиновые мутанты показали специфическую полосу с длиной около 1200 п. н., которая отсутствовала в генотипах с низким содержанием олеиновой кислоты (табл. 3, рис. 4). Как и у предыдущей пары праймеров, была амплифи-цирована фракция 450 п. н., общая между всеми генотипами (рис. 4). Степень выраженности фракции была разной у линий с отличающимися по содержанию олеинового масла генотипами.
Рисунок 4 — Электрофоретические спектры ДНК подсолнечника, амплифи-цированной с аллель-специфичными праймерами по гену О! N i -3F/N2-3R Дорожки: 1 — ВК 876; 2 — ВК 541; 3 — FIA 422; 4 — Fi (ВК 541 х ВК 580); 5 — Fi (НА 422 * ВК 580); 6 — Fi (ЛГ 26 х ВК 580); 7 — Fi (ВК 508 х ВК 580); 8 — RH. 100; 9 — ЛГ 28; 10 — ВК 580; 11 — 83HR4. М — маркер молекулярной массы 100 Ьр. Стрелками обозначены фрагменты ДНК 1200 п. н., маркирующие мутацию высокоолеиновости масла, и 450 п. н., присутствующие у всех генотипов
Маркерный локус N1-2F/X2-1R выявляет наличие мутации Ol у подсолнечника, амплифицируя фрагмент ДНК» 3100 п. н. [6; 7]. Его валидация в генетической коллекции ВНИИМК показала, что у высокоолеиновых генотипов и гибридов, одним из родителей которых является содержащая мутацию Ol линия, амплифици-руется фрагмент, длиной около 3000 п. н., который отсутствует у линий дикого типа (табл. 3).
Также был разработан доминантный маркер INDEL для диагностики на нали-
чие или отсутствие мутации 01 [5]. Показано, что пара праймеров ШЛИ ампли-фицировала фракцию 653 п. н. в мутантных линиях (высокоолеиновые линии), тогда как эта полоса отсутствовала в стандартных линиях подсолнечника [5]. В нашем исследовании Р4/Ю амплифи-цировала одну фракцию ДНК примерно 590 п. н. у высокоолеиновых линий и в потомстве р1 (табл. 3, рис. 5).
1 2 3 4 5 6 7 Í 5 9 10 11 M
Рисунок 5 — Электрофоретические спектры ДНК подсолнечника, амплифи-цированной с аллель-специфичными праймерами по гену OI F4/R1: Дорожки: 1 — ВК 876; 2 — ВК 541;
3 — НА 422; 4 — ft (ВК 541 х ВК 580); 5- F] (НА 422 х ВК 580); 6 — I (ЛГ 26 И ВК 580); 7 — Fi (ВК 508 3* ВК 580); 8 — ЛГ 28;
9 — ВК 580; 10 — 83HR4; 11 — ЛГ 27. М — маркер молекулярной массы 100 Ьр. Стрелкой обозначен фрагмент ДНК 590 п. н., маркирующий мутацию высокоолеиновости масла
Поскольку маркерные локусы являются доминантными, у всех гибридных растений, одним из родителей которого является линия, несущая мутацию 01, также выявляются фрагменты ДНК, маркирующие мутацию. Статус растения -гетерозиготное или гомозиготное по гену 01 — значения не имеет.
Заключение. В результате проведенных исследований были идентифицированы и валидированы молекулярно-генетические маркеры для обнаружения мутации высокоолеиновости для линий ВНИИМК с разным содержанием олеиновой кислоты в масле семян подсолнечника. Два локуса из проанализированных -F13/R5 и N1-1F/N1-1R — амплифициру-ются у всех генотипов независимо от наличия мутации 01. Это позволяет использовать их как контрольные, для
исключения ложноотрицательных результатов на наличие мутации. Локусы N1-2F/N2-1R, N1-3F/N2-1R, N1-3F/N2-2R, N1-3F/N2-3R F4/R1 являются доминантными и маркируют наличие мутации Ol у высокоолеиновых генотипов. Данные маркеры просты в использовании и требуют использования только агарозных гелей. Преимущество использования этих молекулярных маркеров заключается в том, что результаты генотипирования могут быть получены на любом этапе развития растения. Следовательно, селекционеры могут выбраковывать генотипы без мутации высокоолеиновости до цветения, экономя затраты на поддержание нежелательных генотипов. Представленные результаты могут быть использованы для маркер-сопутствующего отбора родительских мутантных форм при получении гибридов на основе генотипов, различающихся по жирно-кислотному составу.
Благодарности. Автор выражает благодарность заведующему лабораторией генетики ВНИИМК Демурину Я.Н и ведущему научному сотруднику лаборатории генетики ВНИИМК Борисенко О.М. за предоставленные семена линий генетической коллекции и гибридов Fi.
1. Афанасьева В. А., Алферов C.B. Определение соотношения полиненасыщенных жирных кислот в пищевых маслах // Известия ТулГУ. Естественные науки. -2018. — Вып. 4. — С. 76-83.
2. Солдатов К.И., Воскоботик Л.К., Харменко JI.H. Высокоолеиновый сорт подсолнечника Первенец // Бюл. НТИ по масличным культурам. — 1976. — Вып. 3. -С. 3-7.
3. Vannozzi G.P. The perspectives of use of high oleic sunflower for oleochemistry and energy raws // Helia. — 2006. — V. 29 (44). — P. 1-24.»
4. Lacombe S., Leger S., Kaan F., Bcrvil-lé A., Sas M. Genetic, molecular and expression features of the Pervenets mutant leading to high oleic acid content of seed oil in
sunflower // Oléagineux, Corps gras, Lipides -2002. -V. 9. — P. 17-23.
5. Schuppert G.F., Tang S., Slabaugh M.B. and Knapp S.J. The sunflower high-oleic mutant Ol carries variable tandem repeats of FAD2-1, a seed-specific oleoyl-phosphatidyl choline desaturase // Molecular Breeding. -2006. -V. 17. — P. 241-256.
6. Lacombe S., Souyris /., Bervillé A.J. An insertion of oleate desaturase homologous sequence silences via siRNA the functional gene leading to high oleic acid content in sunflower seed oil // Molecular Genetics and Genomics. — 2009. — V. 281. — P. 43-54.
7. Bervillé A., Lacombe S., Veillet S., Granier C., Leger S., Jouve P. Method of selecting sunflower genotypes with high oleic acid content in seed oil. United States patent application US 11/587,956. — 2009.
8. Singchai A., Muangsan N., Machikowa T. Evaluation of SSR markers associated with high oleic acid in sunflower // International Journal of Biological, Food, Veterinary and Agricultural Engineering. — 2013. — V. 7. — P. 631-634.
9. Bilgen B.B. Characterization of sunflower inbred lines with high oleic acid content by DNA markers // In: Proc. of the 19th Intern. Sunfl. Conf., Turkey, Edirne, 2016. — P. 662-668.
10. Dimitrijevic A., Imerovski I., Mila-dinovic I)., Cvejic S., Jocic S., Zeremski T., Sakac Z. Oleic acid variation and marker-assisted detection of Pervenets mutation in high- and low-oleic sunflower cross // Crop Breeding and Applied Biotechnology. — 2017. -V. 17. — P. 229-235. DOI: http://dx.doi. org/10.1590/1984-703 32017vl 7n3 a3 6.
11. Демурин Я.Н., Борисенко О.M., Че-банова Ю.В. Наследование признака среднеолеиновости масла в семенах подсолнечника у гибридов второго и третьего поколений // Масличные культуры. Науч-тех. бюл. ВНИИМК. — 2018. — № 3 (175). -С. 3-8. DOI: 10.25230/2412-608Х-2018-3-175-3-8
12. Демурин Я.Н., Борисенко О.М., Че-банова Ю.В. Осевой градиент содержания олеиновой кислоты в частях семени подсолнечника // Масличные культуры. Науч-
тех. бюл. ВНИИМК. — 2014,- №1(157-158). — С. 7-10.
13. Demurin Y., Borisenko О., Bochkarev N. Relationship of inheritance of a high palmitic mutation and plant height in sunflower // Helia. — 2010. — V. 33. -No. 53. — P. 149-154.
14. Демурин Я.Н., Попов П.С., Ефимен-ко С. Г. Гибридологический анализ признака высокоолеиновости масла семян подсолнечника // Науч.-тех. бюл. ВНИИМК.-2001.-№2(125).-С. 3-20.
15. Чебанова Ю.В., Демурин Я.Н., Борисенко О.М. Классификация генетической коллекции подсолнечника ВНИИМК на фенотипические классы по содержанию олеиновой кислоты // Мат-лы IV-й между-нар. науч.-практич. конф. «Современное состояние, проблемы и перспективы развития аграрной науки» / Науч. ред. B.C. Паш-тецкий. — 2019. — С. 213-214.
16. Saghai-Maroof M.A., Soliman К.М., Jorgensen R.A., Allard R.W. Ribosomal DNA spacer-length polymorphisms in barley: Men-delian inheritance, chromosomal location, and population dynamics // PNAS USA. — 1984. -81. — P. 8014-8018.
1. Afanas’eva V.A., Alferov S.V. Opredelenie sootnosheniya polinenasy-shchennykh zhirnykh kislot v pishchevykh maslakh // Izvestiya TulGU. Estestvennye nauki. — 2018. — Vyp. 4. — S. 76-83.
2. Sol dato v K.I., Voskoboynik L.K., Kharchenko L.N. Vysokooleinovyy sort pod-solnechnika Pervenets // Byul. NTI po maslichnym kul’turam. — 1976. — Vyp. 3. — S. 3-7.
3. Vannozzi G.P. The perspectives of use of high oleic sunflower for oleochemistry and energy raws // Helia. — 2006. — V. 29 (44). — P. 1-24.
4. Lacombe S., Leger S., Kaan F., Bervillé A., Sas M. Genetic, molecular and expression features of the Pervenets mutant leading to high oleic acid content of seed oil in sunflower // Oléagineux, Corps gras, Lipides -2002. -V. 9. — P. 17-23.
5. Schuppert G.F., Tang S., Slabaugh M.B. and Knapp S.J. The sunflower high-oleic mutant 01 carries variable tandem repeats of FAD2-1, a seed-specific oleoyl-phosphatidyl choline desaturase // Molecular Breeding. -2006. -V. 17. — P. 241-256.
6. Lacombe S., Souyris I., Berville A.J. An insertion of oleate desaturase homologous sequence silences via siRNA the functional gene leading to high oleic acid content in sunflower seed oil // Molecular Genetics and Genomics. — 2009. — V. 281. — P. 43-54.
7. Berville A., Lacombe S., Veillet S., Granier C., Leger S., Jouve P. Method of selecting sunflower genotypes with high oleic acid content in seed oil. United States patent application US 11/587,956. — 2009.
8. Singchai A., Muangsan N., Machikowa T. Evaluation of SSR markers associated with high oleic acid in sunflower // International Journal of Biological, Food, Veterinary and Agricultural Engineering. — 2013. — V. 7. — P. 631-634.
9. Bilgen B.B. Characterization of sunflower inbred lines with high oleic acid content by DNA markers // In: Proc. of the 19th Intern. Sunfl. Conf., Turkey, Edirne, 2016. — P. 662-668.
10. Dimitrijevic A., Imerovski I., Mila-dinovic D., Cvejic S., Jocic S., Zeremski T., Sakac Z. Oleic acid variation and marker-assisted detection of Pervenets mutation in high- and low-oleic sunflower cross // Crop Breeding and Applied Biotechnology. — 2017. — V. 17. — P. 229-235. DOI: http://dx.doi.org/10.1590/1984-70332017vl7n3a36.
11. Demurin Ya.N., Borisenko O.M., Chebanova Yu.V. Nasledovanie priznaka sredneoleinovosti masla v semenakh pod-solnechnika u gibridov vtorogo i tret’ego pokoleniy // Maslichnye kul’tury. Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. — 2018. — № 3 (175). — S. 3-8. DOI: 10.25230/2412-608X-2018-3-175-3-8.
12. Demurin Ya.N., Borisenko O.M., Chebanova Yu.V. Osevoy gradient soderzhaniya oleinovoy kisloty v chastyakh semeni podsolnechnika // Maslichnye kul’tury. Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. — 2014. — № 1 (157-158). -S. 7-10.
13. Demurin Y., Borisenko O., Bochkarev N. Relationship of inheritance of a high palmitic mutation and plant height in sunflower // Helia.-2010.-V. 33.-No. 53.-P. 149-154.
14. Demurin Ya.N, Popov P.S., Efimenko S.G. Gibridologicheskiy analiz priznaka vysokooleinovosti masla semyan podsolnechnika // Nauch.-tekh. byul. VNIIMK. — 2001. -№ 2 (125). — S. 3-20.
15. Chebanova Yu.V., Demurin Ya.N, Borisenko O.M. Klassifikatsiya geneticheskoy kollektsii podsolnechnika VNIIMK na fe-notipicheskie klassy po soderzhaniyu oleinovoy kisloty // Mat-ly IV-y mezhdunar. nauch.-praktich. konf. «Sovremennoe sostoyanie, problemy i perspektivy razvitiya agrarnoy nauki» / Nauch. red. V.S. Pashtetskiy. — 2019. -S. 213-214.
16. Saghai-Maroof M.A., Soliman KM., Jorgensen R.A., Allard RW. Ribosomal DNA spacer-length polymorphisms in barley: Men-delian inheritance, chromosomal location, and population dynamics // PNAS USA. — 1984. -81. — P. 8014-8018.
Получено: 17.04.2020 Принято: 27.05.2020 Received: 17.04.2020 Accepted: 27.05.2020
Как использовать маркер жидкого мела и какие поверхности использовать его на
Привет, любители искусства! Добро пожаловать в блог Carmel. Я так счастлив, что ты здесь! Ищете ли вы творческие идеи или просто хотите узнать больше о мире продуктов Carmel, вы в правильном месте!
Являетесь ли вы художником или владельцем бизнеса, ищете способ произвести постоянное впечатление, Кармель Маркеры жидкого мела может помочь вам сделать свой след. Если вы ищете простой и удобный способ сделать потрясающие и яркие цветные линии практически на любой гладкой, непористой поверхности, линия жидкого мела маркеров Carmel является идеальным решением для ситуаций, когда маркировка должна быть последовательно удалена и повторно поставлена Полем
Благодаря их быстрому сушке маркеры Кармеля идеально подходят для создания привлекательных произведений искусства и дизайнов на классных досках, стекле, пластике и других поверхностях. Цвета яркие и яркие, и линии можно легко уничтожить влажной тканью или бумажным полотенцем с непористых поверхностей, не оставляя остатка позади.
Сегодняшний блог посвящен тому, чтобы помочь людям обнаружить удивительные возможности использования маркеров Carmel Chalk, от досок меню до зеркал и стеклянных поверхностей- мы будем исследовать все способы, которыми эти маркеры могут сделать вашу жизнь проще и веселее, так что присоединяйтесь к нам и Быть вдохновленным!
Что такое маркеры с жидким мелом?
А Маркер жидкого мела это инструмент, похожий на ручку, который можно использовать для написания на виниловых досках, досках для сухой стирания и других непористых поверхностях. Это здорово, потому что он прост в использовании, а цвет яркий, что делает его идеальным для создания сообщений и рисунков.Где я могу найти маркеры жидкого мела?
Не смотри дальше, чем Маркеры жидкого мела Кармеля ! Эти маркеры мела бывают двух размеров, средний и широкий наконечник и специально разработаны с краской на водной основе, так что вы можете создавать удивительную маркировку, которые легко снимаются — не требуется мела! И самое приятное то, что их краска не содержат ЛОС и растворитель, что делает их отличными как для внутреннего, так и для наружного использования. Так что напишите в этих магазинах, на досках с заметками и многое другое — вы наверняка произвели впечатление с маркерами жидкого мела Carmel!Массив вариантов цвета для маркеров жидкого мела
Маркеры жидкого мела Кармеля — отличный способ добавить удовольствие и творчество к любому проекту. Эти маркеры бывают разных цветов, начиная от базовых черный и белый жирным жирным шрифтам розовый, ярко-голубой, и даже серебро! Яркие цвета добавят пиццу в любой проект, что делает их отличным выбором для искусства и ремесел.Как использовать маркеры жидкого мела
В последние годы маркеры жидкого мела были в моде! Их красочная маркировка повсюду, от ресторанов до продуктовых магазинов до всех видов искусства и ремесел. И хотя они простые и простые в использовании, все всегда помогает чистку основы. Так почему бы не понадобиться несколько минут, чтобы научиться использовать маркеры жидкого мела, как профессионал?Пошаговые инструкции по использованию маркеров жидкого мела:
- Перед использованием всегда хорошая идея встряхнуть маркер. Обязательно сделайте это, пока крышка еще включена.
- Как и все маркеры, активируемые клапаном, маркеры жидкого мела работают, позволяя краске течь на печь (или наконечник), который затем применяется на поверхность при написании или рисунке. Чтобы сделать поток цвета на перо, просто поймайте маркер и нажмите печь на твердую поверхность. Вы почувствуете, что он погрузился в трубку маркера, открывая клапан и позволяя краске просачиваться в печи.
- Нажмите маркер вверх и вниз несколько раз, чтобы выпустить краску — Вы можете дать ему приблизительно 15 насосов каждый раз, когда хотите заполнить печь. Лучше всего это сделать на S Урфейс, кроме того, на котором вы пишете, чтобы вы не отмечали свою поверхность случайно. Удерживайте маркер в вертикальном положении (под прямым углом к поверхности), чтобы избежать капель или пятен.
Несколько хороших советов!
- Не оказывайте слишком большого давления на печи при перекачке маркеров. Это может привести к деформированию пети.
- Всегда выполняйте точечный тест на съемку, прежде чем использовать маркеры на поверхности. Это позволит вам увидеть, совместима ли поверхность с маркерами жидкого мела.
Как удалить маркеры с жидким мелом с непористых поверхностей.
В отличие от обычного мела, который вам необходимо для очистки временных дисплеев, жидкий мел легко вытекает влажной тканью-идеально подходит для этих непористых поверхностей. А лучшая часть? Вы не получите на своих руках пудристого остатка. Всегда используйте чистую и влажную ткань, когда пришло время стереть эти надоедливые отметины с окружающих поверхностей!Влажная ткань и вода должны выполнять работу, если вы пытаетесь удалить упрямые маркировки с поверхностей. Но если вы хотите вычистить немного меньше, возьмите немного универсального или стеклянного чистка и сухой ткани. Это должно заставить эти маркировки исчезнуть! В частности, для стеклянных поверхностей маленький стеклянный очиститель должен сделать.
Лучшие поверхности для маркеров жидкого мела.
Маркеры с жидким мелом Carmel-это идеальный сопутствующий сопутствующий сопутствующий на гладких, непористых поверхностях, таких как стекло, металл и немного пластмасс. Их смелые, яркие цвета заставят ваши произведения искусства на белых досках, досках и многом другом! Независимо от того, насколько творческий T, вы можете легко стереть маркировку с не пористых поверхностей с влажной тканью для временных произведений искусства. Но попробуйте их на поверхностях, отличных от пористых, так как маркировки не будут легко отключаться. Кроме того, держите их подальше от грубых поверхностей, так как печь может быть поврежден.Идеальные поверхности для маркера жидкого мела:
- Виниловые черные доски (*Обратите внимание, что маркеры жидкого мела не снимаются из классных досок для сланцев.)
- Белые доски
- Стекло, запечатанная керамическая плитка, ламинированная древесина.
- Металл, включая оцинкованный металл
- Зеркала
Техническое обслуживание и хранение маркеров жидкого мела
Привет! Хотите убедиться, что вы получили максимальную отдачу от своих маркеров жидкого мела? Вот что делать:
- Держите свои печи и вершины в чистоте — протрите их тканью после каждого использования.
- Храните свои ручки либо на боку, либо в вертикальном положении с крышкой на вершине.
- Убедитесь, что вы хорошо прижимаете кепку, чтобы убедиться, что она плотно!
- Если печь становится забитым, выньте его, промойте в чистой воде или потирая спирт, высушите его и вернитесь к чертежной доске!
Являетесь ли вы ресторатором, ищете идеального маркера меню или художника, я уверен, что вы хотите попробовать эти маркеры мела! Так что не ждите больше! Возьмите несколько цветов и покажите миру, что предлагают отличные продукты Carmel! Продолжай сейчас; Ваша очередь проявить творческий подход с маркером жидкого мела! Наслаждаться!
Поделитесь своими проектами с нами, отметив нас на Instagram Или отправить нам электронное письмо — мы хотели бы увидеть ваши творения!
